Набір ForeDirect RT-qPCR
опис
Набір ForeDirect RT-qPCR призначений для прямої ампліфікації РНК у реальному часі з мазків без процесів очищення РНК.Цей набір завершує цикли qRT-PCR протягом однієї години.Суміш ферментів є оптимізованою сумішшю зворотної транскриптази, ДНК-полімерази Hot-Start Taq, інгібітору РНКази.Реакційний буфер містить усі необхідні компоненти, включаючи оптимізовані буферні компоненти, Mg2+, dUTP і dNTP.
Технічні характеристики
100 т
Компоненти набору
Агент вивільнення нуклеїнової кислоти |
Протектор РНК |
2 × буфер RT-qPCR |
Ферментна суміш (Taq&M-MLV) |
Інструкції |
Застосування ПЛР
1. Після короткого центрифугування пробірок для ПЛР-реакцій помістіть їх у резервуар для зразків приладу для ампліфікації.
2. Термічний протокол
Крок | Температура | час | Цикли | |
1 | Зворотна транскрипція | 50 ℃ | 15 хв | 1 |
2 | Попередня денатурація | 95 ℃ | 1 хв | 1 |
3 | Денатурація | 95 ℃ | 10 секунд | 42 |
4 | Відпал/Нарощування | 60 ℃ | 30 секунд |
Примітка:Флуоресцентний сигнал був виявлений відразу після етапу розширення кожного циклу.
3. Після налаштування збережіть файл і запустіть програму реакції.
Етапи експлуатації
Перед приготуванням реагентів усі реагенти в наборі слід розморозити при кімнатній температурі та обережно перемішати.
Підготовка реагентів
1. Приготуйте суміш для вивільнення нуклеїнової кислоти
компонент | Об'єм на зразок або контроль |
Агент вивільнення нуклеїнової кислоти | 5 мкл |
Протектор РНК | 0,5 мкл |
2. Приготуйте реакційну суміш
компонент | Об'єм на зразок або контроль |
2 × буфер RT-qPCR | 15 мкл |
Ферментна суміш (Taq&M-MLV) | 1,5 мкл |
Праймери та зонди | 1 мкл |
Зберігання та термін придатності
-Набір повинен зберігатися при -20± 5℃.Термін дії 12 місяців.
- Уникайте повторних циклів заморожування-відтавання (<5 циклів).