• facebook
  • Linkedin
  • youtube
English
page_banner

ДНК-полімераза Foreasy HS Taq

Рекомендоване зображення ДНК-полімерази Foreasy HS Taq
  • ДНК-полімераза Foreasy HS Taq

Опис набору:

◮Висока специфічність: фермент із високою активністю гарячого старту.

◮Швидке посилення: 10 с/кб.

◮Висока адаптивність шаблону: можна використовувати для ефективного посилення HighGCзначенняірізні шаблони ДНК, які важко піддаються ампліфікації.

◮Сильна точність: точність становить 6 разівof звичайний фермент Taq.

чужа сила


Деталі продукту

Теги товарів

FAQ

опис

ДНК-полімераза Foreasy HS Taq — це новий фермент Taq, який експресується в бактеріях Escherichia coli за допомогою технології рекомбінації генів.Після обробки ферменту за допомогою спеціального процесу він'Активність s пригнічується перед термічною активацією, тим самим пригнічуючи неспецифічну ампліфікацію, викликану неспецифічним відпалом праймерів або димерів праймерів в умовах низької температури.Цей продукт підходить для високоспецифічної PCR Reactіон, багаторазова ПЛР , високий вміст GC (> 60%) ,звторинна структурачи іншесильний фоновий геномicsампліфікація та масштабний геномicsвиявлення посилення.Фермент має 5' → 3' ДНК-полімеразну активність і 5' → 3' екзонуклеазну активність, але не має 3' → 5' екзонуклеазної активності.

Компоненти набору

компонент ІМ-01021 ІМ-01022 ІМ-01023
ДНК-полімераза Foreasy HS Taq (5 ОД/мкл)  5000 ОД (1 мл)  50 KU (10 мл)  500 KU (100 мл)
2 × буфер реакції Taq  25 мл × 5  250 мл × 5  500 мл × 25

Особливості та переваги

- Висока специфічність: фермент із високою активністю гарячого старту.

- Швидке посилення: 10 с/кб.

- Висока адаптивність шаблону: можна використовувати для ефективного посилення HighGCзначенняірізні шаблони ДНК, які важко піддаються ампліфікації.

- Сильна точність: точність становить 6 разівof звичайний фермент Taq.

Аплікація комплекту

- Різні системи ПЛР/кПЦР і системи прямої ПЛР

- ПЛР-ампліфікований фрагмент ДНК

- знак ДНК

- Секвенування ДНК

- ПЛР плюс хвіст А

Визначення діяльності

1U : кількість ферменту, необхідна для включення 10 нмольДНКв нерозчинну в кислоті речовину з використанням активованої ДНК сперми лосося як матриці/праймера, 74 °C, 30 хвилин.

Умова реакції

Температура Час реакції Час циклу
37°C 5 хв 1
94°C 5 хв 1
94°C 10 сек  40
60°C 10 сек

Примітка:Для систем на 10 мкл і 20 мкл додайте рівний об’єм мінеральної олії, якщо термоциклер не має кришки для нагрівання.

Умови реакції ПЛР змінюються залежно від структурних умов матриць, праймерів тощо.Під час конкретної операції необхідно розробити оптимальні умови реакції, включаючи температуру відпалу, час подовження тощо, відповідно до конкретних умов, таких як тип матриці, розмір цільового фрагмента, послідовність основ ампліфікованого фрагмента та вміст GC і довжина праймера.

Зберігання

-20 ± 5 °C протягом 2 років або при -80 °C для тривалого зберігання.

  • Попередній:
  • далі:

    • Немає сигналів посилення

    1. ДНК-полімераза Taq у наборі втрачає свою активність через неправильне зберігання або закінчення терміну придатності набору.
    Рекомендація: Перевірте умови зберігання набору;повторно додайте відповідну кількість ДНК-полімерази Taq до системи ПЛР або придбайте новий набір для ПЛР у реальному часі для відповідних експериментів.

    2. Є багато інгібіторів Taq ДНК-полімерази в матриці ДНК.
    Пропозиція: повторно очистіть шаблон або зменшіть його кількість.

    3. Концентрація Mg2+ не підходить.
    Рекомендація: Концентрація Mg2+ у суміші 2× Real PCR Mix, яку ми надаємо, становить 3,5 мМ.Однак для деяких спеціальних праймерів і шаблонів концентрація Mg2+ може бути вищою.Таким чином, ви можете безпосередньо додати MgCl2 для оптимізації концентрації Mg2+.Для оптимізації рекомендується щоразу збільшувати Mg2+ на 0,5 мМ.

    4. Умови ПЛР-ампліфікації невідповідні, а послідовність або концентрація праймера невідповідна.
    Пропозиція: підтвердьте правильність послідовності праймерів і праймер не був деградований;якщо сигнал посилення поганий, спробуйте знизити температуру відпалу та відповідним чином відрегулювати концентрацію праймера.

    5. Обсяг шаблону занадто малий або забагато.
    Рекомендація: виконайте градієнтне розведення лінеаризації шаблону та виберіть концентрацію шаблону з найкращим ефектом ПЛР для експерименту ПЛР у реальному часі.

    NTC має занадто високе значення флуоресценції

    1. Забруднення реагентом під час роботи.
    Рекомендація: замініть на нові реагенти для експериментів ПЛР у реальному часі.

    2. Зараження відбулося під час підготовки реакційної системи ПЛР.
    Рекомендація: вживайте необхідних заходів захисту під час роботи, таких як: носіння латексних рукавичок, використання наконечника піпетки з фільтром тощо.

    3. Праймери руйнуються, і руйнування праймерів спричинить неспецифічну ампліфікацію.
    Пропозиція: використовуйте електрофорез SDS-PAGE, щоб виявити, чи праймери деградували, і замініть їх новими праймерами для експериментів ПЛР у реальному часі.

    Праймерний димер або неспецифічна ампліфікація

    1. Концентрація Mg2+ не підходить.
    Рекомендація: Концентрація Mg2+ у суміші 2× Real PCR EasyTM Mix, яку ми надаємо, становить 3,5 мМ.Однак для деяких спеціальних праймерів і шаблонів концентрація Mg2+ може бути вищою.Таким чином, ви можете безпосередньо додати MgCl2 для оптимізації концентрації Mg2+.Для оптимізації рекомендується щоразу збільшувати Mg2+ на 0,5 мМ.

    2. Температура відпалу ПЛР занадто низька.
    Пропозиція: щоразу підвищуйте температуру відпалу ПЛР на 1 ℃ або 2 ℃.

    3. Продукт ПЛР занадто довгий.
    Рекомендація: довжина продукту ПЛР у реальному часі має становити 100-150 bp, але не більше 500 bp.

    4. Праймери деградують, і деградація праймерів призведе до появи специфічної ампліфікації.
    Пропозиція: використовуйте електрофорез SDS-PAGE, щоб виявити, чи праймери деградували, і замініть їх новими праймерами для експериментів ПЛР у реальному часі.

    5. Система ПЛР неналежна, або система замала.
    Порада: занадто мала реакційна система ПЛР призведе до зниження точності визначення.Найкраще використовувати реакційну систему, рекомендовану приладом для кількісної ПЛР, для повторного проведення експерименту з ПЛР у реальному часі.

    Погана повторюваність кількісних значень

    1. Прилад несправний.
    Пропозиція: між кожним ПЛР-отвором приладу можуть бути помилки, що призводить до поганої відтворюваності під час керування температурою або виявлення.Будь ласка, перевірте відповідно до інструкцій відповідного приладу.

    2. Чистота зразка погана.
    Рекомендація: нечисті зразки призведуть до поганої відтворюваності експерименту, що включає чистоту шаблону та праймерів.Найкраще повторно очистити шаблон, а праймери найкраще очищати SDS-PAGE.

    3. Час підготовки та зберігання ПЛР-системи надто довгий.
    Порада: використовуйте систему ПЛР у реальному часі для ПЛР-експерименту одразу після підготовки та не залишайте її надовго.

    4. Умови ПЛР-ампліфікації невідповідні, а послідовність або концентрація праймера невідповідна.
    Пропозиція: підтвердьте правильність послідовності праймерів і праймер не був деградований;якщо сигнал посилення поганий, спробуйте знизити температуру відпалу та відповідним чином відрегулювати концентрацію праймера.

    5. Система ПЛР неналежна, або система замала.
    Порада: занадто мала реакційна система ПЛР призведе до зниження точності визначення.Найкраще використовувати реакційну систему, рекомендовану приладом для кількісної ПЛР, для повторного проведення експерименту з ПЛР у реальному часі.

    Напишіть своє повідомлення тут і надішліть його нам

    Пов'язаніПродукти

    Натисніть Enter для пошуку або ESC щоб закрити