Протокол Animal Tissue Direct PCR kit-UNG (без інструментів для відбору проб)
Описи
У цьому наборі використовується унікальна буферна система лізису для швидкого вивільнення геномної ДНК із зразків тканин тварин для ПЛР-реакцій, тому він особливо підходить для широкомасштабного генетичного тестування.
Процес вивільнення геномної ДНК з буфера лізису завершується протягом 10-30 хвилин при 65°C.Жодних інших процесів, таких як видалення білків і РНК, не потрібно, а вивільнену слідову ДНК можна використовувати як матрицю для реакції ПЛР.
2×ПЛР ЛегкоTMMix (UNG) використовує dUTP замість dTTP на основі 2×PCR EasyTMЗмішайте та додайте фермент UNG (урацил-N-глікозилазу), який може одночасно розщепити шаблон, що містить dUTP.Перед реакцією ПЛР використовується фермент UNG для розкладання продукту ПЛР, що містить урацил.Фермент UNG не буде впливати на матрицю, яка не містить урацил, що забезпечує специфічність і точність ампліфікації та запобігає можливості контамінації продуктів ПЛР під час широкомасштабного генетичного тестування.
ДНК-полімераза D-Taq — це ДНК-полімераза, спеціально розроблена Foregene для прямих реакцій ПЛР.ДНК-полімераза D-Taq має сильну толерантність до різноманітних інгібіторів реакції ПЛР і може ефективно ампліфікувати слідові кількості ДНК у різних складних реакційних системах, а швидкість ампліфікації може досягати 2 Кб/хв, що особливо підходить для реакції прямої ПЛР.
Компоненти набору
Частина І | Буфер AL |
Foregene протеаза | |
6 × буфер для завантаження ДНК | |
Частина II | 2×ПЛР ЛегкоTMМікс (UNG) |
Особливості та переваги
■Відсутність трудомісткої та дорогої очистки ДНК
■ Попит на зразки невеликий, можна протестувати лише 5 мг тваринної тканини.
■ Не потрібна спеціальна обробка, така як подрібнення та дроблення, а операція проста.
■ Оптимізована система ПЛР робить ПЛР більш специфічною та толерантною до інгібіторів реакції ПЛР.
■ Система ПЛР проти забруднення 2×ПЛР ЛегкоTMСуміш (УНГ) ефективно усуває забруднення, викликані продуктами ПЛР, і забезпечує специфічність і точність ампліфікації.
Параметри набору
Застосування: різноманітні тканини тварин.
ДНК, вивільнена в результаті лізису зразка: використовується лише як матриця для ПЛР.
Набір можна використовувати для наступних цілей: ідентифікація трансгенозів, генотипування тварин тощо.
Потік роботи
Зберігання та термін придатності
Частина I цього набору повинна зберігатися в 2-8℃.
Реагент Buffer AL можна зберігати протягом 12 місяців у сухих умовах;його можна зберігати при 2-8℃для більш тривалого зберігання.
Реагент Foregene Protease має унікальну формулу.Для забезпечення його активності та стабільності зберігайте його на 4℃на 12 місяців.
Реагент 6×Буфер завантаження ДНК можна зберігати на 4℃або -20℃довго.
Частину II цього набору слід зберігати при -20℃.
Реагент 2×ПЛР ЛегкоTMСуміш (UNG), якщо вона часто використовується, її також можна зберігати на 4℃для короткочасного зберігання (використати протягом 10 днів).