Direct RT-qPCR Kit III
Опис набору:
◮Набір Direct RT-qPCR із використанням Foreasy Reverse Transcriptase і Foreasy HS Taq DNA Polymerase, розроблених компанією Foregene, з унікальним реакційним буфером робить цей набір високою стійкістю та сумісністю, і він може безпосередньо тестувати реакцію, використовуючи систему Foregene Lysis як шаблон.Цей набір можна використовувати для розробки набору для виявлення нуклеїнової кислоти COVID-19 та інших патогенних бактерій.
опис
Набір Direct RT-qPCR Kit містить окремо упакований буфер RT-qPCR (зі сумішшю ДНК-полімерази Foreasy HS Taq) і високоефективнийЗворотна транскриптаза Foreasy (MMLV),що робить його зручним для створення базових комплектів і налаштування системи в рамках простої перевірки.
Набір Direct RT-qPCR із використанням Foreasy Reverse Transcriptase і Foreasy HS Taq DNA Polymerase, розроблених компанією Foregene, з унікальним реакційним буфером робить цей набір високою стійкістю та сумісністю, і він може безпосередньо тестувати реакцію, використовуючи систему Foregene Lysis як шаблон.Цей набір можна використовувати для розробки набору для виявлення нуклеїнової кислоти COVID-19 та інших патогенних бактерій.
Цей набір може бути безпосередньо компонентом продукту IVD, використовувати його легко та швидко.Потрібна лише легка перевірка, без повторної розробки.
Технічні характеристики
500T, 50 000T
Компоненти набору
| Вміст набору (20 мкл реакційна система) | ІМ-05111-03 | ІМ-05112-03 |
| 500 т | 50 000 т | |
| Форізі Рзворотна транскриптаза(200 Од/μL) | 50 мкл×1 | 1 мл×5 |
| 2× Пряма КПЦРМікс-Такман | 1 мл × 5 | 500 мл×1 |
| Інструкція | 1 | 1 |
Етапи експлуатації
A: Підготуйте шаблон і реагент
1. Підготуйте підготовлену матрицю РНК (рекомендується використовувати набір Foregene Total RNA Isolation Kit для виділення та очищення матриці РНК) або продукт для крекінгу зразка (рекомендується використовувати систему Foregene Lysis), спеціальні праймери (10 мкМ) та інші відповідні витратні матеріали, інструмент.
2. Помістіть 2× прямого буфера RT-qPCR, ddH2O без РНКази та 20× еталонного барвника ROX (якщо він потрібен) у коробку з льодом, змусивши їх розтанути природним чином, і обережно перемішайте.
B: Підготуйте систему RT-qPCR
Отримайте половину об’єму реакційного буфера реакційної системи (наприклад, якщо об’єм системи становить 20 мкл, потрібно отримати 10 мкл 2× прямого буфера RT-qPCR). длявідповідну кількість ферменту,ми пропонуємо цеM-MLV: 10-30 ОД/20 мкл реакційна система,TaqДНК-полімераза:1-2 U/20 мкл реакційної системице наша пропозиція, ви повинні протестувати та налаштувати її), додайте матрицю РНК, специфічні праймери та зонди, а також додайте ddH без РНКази2O до 20 мкл.Конкретну підготовку реакційної системи RT-qPCR можна знайти в наступній таблиці 1.
Таблиця 1: Підготовка системи RT-qPCR
| компонент | Обсяг | Кінцева концентрація |
| 2× Прямий буфер RT-qPCR | 10 мкл | 1× |
| Зворотна транскриптаза Foreasy (MMLV) | 10-30 U | |
| ДНК-полімераза Foreasy HS Taq | 1-2 U | |
| Прямий праймер (10 мкМ) | 0,8 мкл | 50-900 нМ |
| Зворотний праймер (10 мкМ) | 0,8 мкл | 50-900 нМ |
| Зонд (4 мкМ) | 1 мкл | 200 нМ |
| Шаблон (РНК або лізат) | X мкл | |
| 20 × еталонний барвник ROX | - | 1* |
| РНКаза-FreeddH2O | (6,4-Х) мкл | |
| Загальний обсяг | 20 мкл |
Примітка: прямий праймер і зворотний праймер є специфічними праймерами цільового гена.Систему КПЦР можна налаштувати відповідно до практичних експериментальних і ПЛР моделей.Ми рекомендуємо 400 нМ для кінцевої концентрації більшості праймерів.Будь ласка, відрегулюйте об’єм конкретних праймерів і зондів відповідно до приготовленої концентрації та рекомендованої кінцевої концентрації.
1*: Виберіть відповідну кінцеву концентрацію еталонного барвника ROX відповідно до різних інструментів кількісної ПЛР.Оптимальна концентрація еталонного барвника ROX для звичайних інструментів для кількісної ПЛР наведена в наступній таблиці:
| Прилади кількісної ПЛР | Кінцева концентрація еталонного барвника ROX |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/Крок перший,тощо | 1× (наприклад, додайте 1 мкл 20×ROX Reference Dye у 20 мкл реакційної системи) |
| ABI 7500, 7500 Fast, Stratagene Mx3000P, Mx3005P і Mx4000 тощо. | 0,5× (наприклад, додайте 0,5 мкл 20×ROX Reference Dye у 20 мкл реакційної системи) |
| Прилад для ПЛР Roche, прилад для ПЛР Bio-Rad, прилад для кількісної ПЛР Eppendorf тощо. | Без еталонного барвника ROX |
Зберігання та термін придатності
Набір слід зберігати при -20 ± 5 ℃.Його слід негайно зберігати в термостатичному холодильнику -20 ℃.Термін придатності 2 роки за умови зберігання в належних умовах.
