Прямий комплект RT-qPCR
Опис набору:
◮ Набір Direct RT-qPCR із використанням Foreasy Reverse Transcriptase і Foreasy HS Taq DNA Polymerase, розроблених компанією Foregene, з унікальним реакційним буфером робить цей набір високою стійкістю та сумісністю, і він може безпосередньо тестувати реакцію, використовуючи систему Foregene Lysis як шаблон.Цей набір можна використовувати для розробки набору для виявлення нуклеїнової кислоти COVID-19 та інших патогенних бактерій.
опис
Набір Direct RT-qPCR Kit містить окремо упакований буфер RT-qPCR і високоефективний ферментсуміші (Taq、M-MLV、RI), що робить її зручною для створення базових наборів і системналаштування, у межах простої перевірки.
Технічні характеристики
500T, 50 000T
Компоненти набору
| Вміст набору (20 мкл реакційна система) | ІМ-05111-01 | ІМ-05112-01 |
| 500 т | 50 000 т | |
| Пряма ферментна суміш | 500 мкл×1 | 50 мл×1 |
| 2× Прямий буфер RT-qPCR | 1 мл×5 | 500 мл×1 |
| Інструкція | 1 | 1 |
Етапи експлуатації
Перед приготуванням реагентів усі реагенти в наборі слід розморозити при кімнатній температурі та обережно перемішати.
A: Приготуйте of шаблон і реагент
1. Підготуйте підготовлену матрицю РНК (рекомендується використовувати набір Foregene Total RNA Isolation Kit для виділення та очищення матриці РНК) або продукт для крекінгу зразка (рекомендується використовувати систему Foregene Lysis), спеціальні праймери (10 мкМ) та інші відповідні витратні матеріали, інструмент.
2. Помістіть 2× Прямий буфер RT-qPCR, ddH2O без РНКази та 20× ROX Reference Dye (якщо це'потрібно) у коробці з льодом, змусивши їх танути природним чином, і обережно перемішати.
B: Приготуйте of RT-qPCR система
Таблиця 1 : Приготуйте of RT-qPCR sсистема
| компонент | Обсяг | Кінцева концентрація |
| 2× Прямий буфер RT-qPCR | 10 мкл | 1× |
| Пряма ферментна суміш | 1мкл | |
| Прямий праймер (10 мкМ) | 0,8 мкл | 50-900 нМ |
| Зворотний праймер (10 мкМ) | 0,8 мкл | 50-900 нМ |
| Зонд (4 мкМ) | 1мкл | 200 нМ |
| Шаблон (РНК або лізат) | X мкл | |
| 20×ROX Reference Dye | - | 1* |
| РНКаза-FreeddH2O | (6,4-Х) мкл | |
| Загальний обсяг | 20мкл |
C: встановити в RT-qPCR реакція програма
Таблиця 2 : RT-qPCR reaction програма налаштування (для приклад: два-крок метод)
| Крок | Температура | час | Цикли | Зміст | |
| 1 | 50 ℃ | 15 хв | 1* | 1 | Зворотна транскрипція |
| 2 | 95 ℃ | 1 хв | 1 | Попередня денатурація | |
| 3 | 95 ℃ | 10 сек | 40-45 | Денатурація | |
| 60 ℃ | 30 секунд 2* | Відпал/Нарощування | |||
Зберігання та термін придатності
-Набір повинен зберігатися при -20± 5℃.Термін дії 12 місяців.
- Уникайте повторних циклів заморожування-відтавання (<5 циклів).
