QuickEasyᵀᴹ Real Time PCR Kit-Taqman
Описи
2× QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman, наданий QuickEasyTMНабір для ПЛР у реальному часі Taqman kit — це система головної суміші нового покоління, розроблена для реакції ампліфікації в режимі ПЛР у реальному часі з використанням спеціальних флуоресцентних зондів.Його основна ДНК-полімераза Foregene HS Taq базується на модифікації антитіл, використовується разом із додатково оптимізованою системою ПЛР Foregene, має вищу специфічність і ефективність ампліфікації.Порівняно зі звичайною сумішшю для ПЛР, він має сильнішу здатність до ампліфікації та нижчий рівень невідповідності.Його можна використовувати в флуоресцентній кількісній реакції ПЛР для зменшення неспецифічної ампліфікації та підвищення точності ПЛР.Це може значно покращити специфічність продукту та чутливість реакції.У той же час ROX був наданий як внутрішній еталонний барвник.
QuickEasyTMНабір Real Time PCR Kit-Taqman має широку сферу застосування для кількості шаблонів і може отримати хорошу стандартну криву в різних кількісних областях, а також може точно кількісно визначити та виявити цільові гени з хорошою повторюваністю та високою достовірністю.
Технічні характеристики
200 приготувань,500 препаратів,1000 приготувань,2000 Preps
Компоненти набору
QuickEasyTMНабір для ПЛР у реальному часі Taqman(20мклсистема) | ||||
Вміст набору | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
200 Пригот | 500 Пригот | 1000 Пригот | 2000 Preps | |
2×швидколегкоTM Справжня ПЛР Змішати-Такман | 1 мл×2 | 1,7 мл×3 | 1,7 мл×6 | 1,7 мл×12 |
20×Еталонний барвник ROX | 200мкл | 0,5 мл | 1 мл | 1 мл×2 |
ddH без ДНКаз2O | 1,7 мл | 1,7 мл×2 | 10 мл | 20 мл |
IFU | 1шматок | 1шматок | 1шматок | 1шматок |
Особливості та переваги
■ Унікальна система оптимізації ПЛР робить 2×QuickEasyTMReal PCR Mix-Taqman більш сумісний.
■ Полімераза Foregene HS Taq з гарячим стартом має вищу ефективність ампліфікації, вищу чутливість ампліфікації та вищу специфічність ампліфікації.
■ 2× QuickEasyTM Real PCR Mix -Taqman використовує унікальну систему, оптимізовану компанією Foregene, для підвищення чутливості та специфічності визначення послідовності зонда, який можна використовувати для генотипування та визначення варіації кількості копій і отримання точних результатів.
■ Цей продукт постачається з внутрішнім еталонним барвником ROX, який можна використовувати для усунення фону сигналу та помилки сигналу між лунками, що зручно для клієнтів у використанні в різних типах інструментів для кількісної ПЛР.
Аплікація комплекту
■ Флуоресцентна кількісна ПЛР для кількісного аналізу матриці;
■ Cтрадиційна ПЛР-ампліфікація;
■ Можна використовувати для виявлення алелів.
Зберігання та термін придатності
Набір слід зберігати при температурі -20°C у темряві;якщо він часто використовується, його також можна зберігати при 4°C протягом короткого періоду часу (використати протягом 10 днів).
Принципи розробки праймерів ПЛР у реальному часі
Прямий і зворотний буквари
Для ПЛР у реальному часі дизайн праймера дуже важливий.Праймери пов’язані зі специфічністю та ефективністю ПЛР-ампліфікації та можуть бути розроблені з посиланням на такі принципи:
Довжина грунтовки: 18-30 п.н.
Вміст ГХ: 40-60%.
Значення Tm: програмне забезпечення для розробки праймера, наприклад Primer 5, може надати значення Tm праймера.Значення Tm перших і наступних праймерів повинні бути якомога ближчими.Також можна використовувати формулу розрахунку Tm: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Під час проведення ПЛР температуру нижче значення Tm праймера 5 °C зазвичай вибирають як температуру відпалу (відповідне підвищення температури відпалу може збільшити специфічність реакції ПЛР).
Праймери та продукти ПЛР:
Довжина продукту ПЛР-ампліфікації праймеру переважно становить 100-150 bp.
Наскільки це можливо, слід уникати дизайнерських праймерів у вторинній структурній зоні шаблону.
Уникайте утворення 2 або більше комплементарних основ між 3'-кінцями верхнього та нижнього за течією праймерів.
Основа грунтовки 3' не може бути присутня з 3 додатковими послідовними G або C.
Самі праймери не можуть мати комплементарних структур, інакше утворюється шпилькова структура, яка впливає на ПЛР-ампліфікацію.
ATCG слід розподілити якомога рівномірніше в послідовності праймерів, і слід уникати 3' кінцевої основи, оскільки T.
Додаток 1: Додатковий пакет компонентів Cell Direct RT-qPCR Kit
1.Розчин для лізису клітин
| |||
Компоненти набору (24-лункова система лізису/лунка) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 т | 500 т | ||
частиная | Буфер CL | 20 мл | 100 мл |
Foregene Protease Plus II | 400 мкл | 1 мл × 2 | |
Буфер ST | 1 мл × 2 | 10 мл | |
частинаII | Ластик ДНК | 400 мкл | 1 мл × 2 |
2.RT Mix
| |
Компоненти набору (20 мкл реакційна система) | DRT-01011-B1 |
200 т | |
5× Direct RT Mix | 800 мкл |
ddH без РНКази2O | 1,7 мл × 2 |
| ||
Компоненти набору (20 мкл реакційна система) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 т | 1000 т | |
2× Direct qPCR Mix-SYBR | 1 мл × 2 | 1,7 мл × 6 |
50 × еталонний барвник ROX | 40 мкл | 200 мкл |
ddH без РНКази2O | 1,7 мл | 10 мл |