Buccal Swab/FTA Card DNA Isolation Kit Набір для виділення геномної ДНК або набір для очищення з буккальних тампонів
Опис набору:
Швидко очистіть високоякісну геномну ДНК із зразків буккального мазка/FTA Card.
◮Відсутність забруднення РНКазою:Колонка лише для ДНК, що входить до складу набору, дає змогу видалити РНК із геномної ДНК без додавання РНКази під час експерименту, запобігаючи забрудненню лабораторії екзогенною РНКазою.
◮Швидка швидкість:Foregene Protease має вищу активність, ніж аналогічні протеази, і швидко перетравлює зразки тканин;операція проста, і операцію екстракції геномної ДНК можна завершити протягом 20-80 хвилин.
◮Зручно:Центрифугування проводять при кімнатній температурі, і немає потреби у низькотемпературному центрифугуванні 4°C або осадженні ДНК етанолом.
◮Безпека:Екстракція органічних реагентів не потрібна.
◮Висока якість:Екстрагована геномна ДНК містить великі фрагменти, не містить РНК, РНКази та надзвичайно низький вміст іонів, що може відповідати вимогам різних експериментів.
◮Система мікроелюції:Це може збільшити концентрацію геномної ДНК, що зручно для подальшого виявлення або експерименту.
опис
Цей набір забезпечує ефективний і швидкий метод отримання геномної ДНК високої концентрації з буккальних мазків і FTA Card (кров’яних плям).За допомогою нашої компанії'Унікальна колонка з силікатною мембраною, що містить тільки ДНК, і формула, у поєднанні з Foregene Protease, високоякісну геномну ДНК у високій концентрації можна виділити за 80 хвилин.Спеціально розроблена мала колонка для очищення зв’язує геномну ДНК, і ДНК може бути елюйована невеликою кількістю (15 мкл) система елюції для збільшення концентрації отриманої геномної ДНК, що зручно для подальшого виявлення або експерименту.Набір може обробляти один або кілька зразків одночасно, і процес очищення не вимагає екстракції органічних речовин, таких як фенол, хлороформ, та трудомісткого осадження ізопропанолом або етанолом, а операція проста та економить час.
Технічні характеристики
50 Пригот
Компоненти набору
| Буфер ST1 |
| Буфер ST2 |
| Лінійний акриламід |
| Буфер PW |
| Буфер WB |
| Буфер EB |
| Foregene протеаза |
| Колонка лише ДНК |
| Інструкції |
Особливості та переваги
- Відсутність забруднення РНКазою: колонка лише з ДНК, що входить до комплекту, дає змогу видалити РНК із геномної ДНК без додавання РНКази під час експерименту, уникаючи забруднення лабораторії екзогенною РНКазою.
-Швидка швидкість: протеаза Foregene має вищу активність, ніж аналогічні протеази, швидко перетравлює зразки;проста операція.
- Зручно: центрифугування проводиться при кімнатній температурі, і немає потреби в центрифугуванні при низькій температурі 4°C або осадженні ДНК етанолом.
-Безпека: екстракція органічних реагентів не потрібна.
-Висока якість: вилучена геномна ДНК містить великі фрагменти, не містить РНК, РНКази та надзвичайно низький вміст іонів, що може відповідати вимогам різних експериментів.
-Система мікроелюції: вона може збільшити концентрацію геномної ДНК, що зручно для подальшого виявлення або експерименту.
Аплікація комплекту
Він підходить для очищення геномної ДНК з наступних зразків: буккальні мазки, FTA Card (плями крові).
Зберігання та термін придатності
-Цей набір можна зберігати протягом 12 місяців у сухих умовах при кімнатній температурі (15-25°C);якщо його потрібно зберігати протягом більш тривалого періоду часу, його можна зберігати при 2-8°C.
Примітка: якщо зберігати при низькій температурі, розчин схильний до утворення осаду.Перед використанням обов’язково помістіть розчин у набір при кімнатній температурі на деякий час.При необхідності попередньо підігрійте його на водяній бані при 37°C протягом 10 хвилин, щоб розчинити осад, і перемішайте перед використанням.
-Foregene Protease solution має унікальну формулу, яка активна при тривалому зберіганні при кімнатній температурі (3 місяці);його активність і стабільність будуть кращими при зберіганні при 4 °C, тому рекомендується зберігати його при 4 °C, пам'ятайте, що не можна зберігати його при -20 °C.
Очисна колонка засмічена
У цьому наборі під час операції екстракції геномної ДНК колонка для очищення безпосередньо адсорбується на суміші ферментативного лізису зразка без етапу центрифугування, і колонка для очищення може бути заблокована через неповну ферментацію та високу в’язкість зразка.
Можливі наступні причини:
1. Неповне ферментативне розщеплення зразків тканин.
Рекомендація: час обробки зразка Foregene Protease можна відповідним чином подовжити або взяти супернатант після центрифугування при 12 000 об/хв (~13 400 × g) протягом 5 хвилин.
2. Надмірне використання зразків тканин або великих тканин.
Рекомендація: найкраще не перевищувати 1 буккальний тампон у зразку;якщо зразок занадто великий, відповідно збільште дозу буфера ST1, Foregene Protease, буфера ST2.
3. В'язкість зразка занадто висока.
Рекомендація: Зразки можна відповідним чином розбавити 10 мМ Tris-HCl перед екстракцією геномної ДНК.
4. Фрагменти карти крові висмоктані.
Рекомендація: перехідний час центрифугування на етапі 6 екстракції генома плями крові (карта FTA) можна відповідно подовжити.
Низький вихід або відсутність ДНК
На вихід геномної ДНК часто впливають різноманітні фактори, зокрема походження зразка, умови зберігання зразка, підготовка зразка, маніпуляції тощо.
Геномну ДНК неможливо отримати під час екстракції
Можливі причини:
1. Неналежне збереження зразків або занадто тривале зберігання призводить до деградації геномної ДНК.
Рекомендація: мазки з порожнини рота бажано брати свіжі, і не рекомендується використовувати консервовані тампони для операцій із виділення геномної ДНК;зразки плям крові повинні гарантувати відповідну якість, а час зберігання не повинен бути надто довгим.
2. Занадто мало використання тканини може призвести до відсутності вилучення відповідної геномної ДНК.
Рекомендація: дотримуйтесь інструкцій щодо взяття зразків буккального мазка в посібнику з експлуатації та витирайте стільки разів, скільки можливо, щоб достатню кількість клітин можна було прикріпити до ротового тампона для екстракції геномної ДНК;для вилучення зразка плями крові площу вирізання плями крові можна відповідно збільшити.
3. Foregene Protease неправильно зберігається, що призводить до зниження її активності або інактивації.
Рекомендація: перевірте умови зберігання Foregene Protease або замініть її на нову Foregene Protease для ферментативної реакції.
4. Неналежне збереження набору або надто тривалий час зберігання, що призводить до виходу з ладу деяких компонентів набору.
Рекомендація: придбайте новий набір для виділення ДНК буккального тампона для відповідних процедур.
5. Буфер WB не додає абсолютний етанол.
Рекомендація: переконайтеся, що буфер WB додає правильний об’єм абсолютного етанолу.
6. Елюент неправильно додано до силіконової плівки.
Рекомендація: додайте краплі попередньо нагрітого до 65 °C елюенту в середину силіконової мембрани та залиште при кімнатній температурі на 5 хвилин, щоб підвищити ефективність елюювання.
Виділена геномна ДНК з низьким виходом
Можливі наступні причини:
1. Неналежне збереження зразків або занадто тривале зберігання призводить до деградації геномної ДНК.
Рекомендація: мазки з порожнини рота бажано брати щойно взяті, а збережені тампони не слід використовувати для екстракції геномної ДНК.
2. Якщо кількість зразка тканини занадто мала, вміст екстрагованої геномної ДНК буде меншим.
Рекомендація: дотримуйтесь інструкцій із взяття мазка з ротової порожнини в посібнику з експлуатації, протираючи стільки разів, скільки можливо, щоб достатню кількість клітин можна було прикріпити до тампона з порожнини рота для екстракції геномної ДНК.
3. Foregene Protease неправильно зберігається, що призводить до зниження її активності або інактивації.
Рекомендація: перевірте умови зберігання Foregene Protease або замініть її на нову Foregene Protease для ферментативної реакції.
4. Проблеми елюентів.
Рекомендація: використовуйте буфер EB для елюції;якщо використовується ddH2O або інших елюентів, переконайтеся, що рН елюату становить 7,0-8,5.
5. Елюат неправильно доданий по краплях.
Рекомендація: додайте краплі елюенту в середину силіконової мембрани та залиште при кімнатній температурі на 5 хвилин, щоб підвищити ефективність елюювання.
6. Елюююча рідина накопичується занадто мало.
Рекомендація: Використовуйте елюент для елюції геномної ДНК, як того вимагає інструкція, принаймні не менше 15 мкл.
Виділена геномна ДНК низької чистоти
Низька чистота геномної ДНК може призвести до невдачі або незадовільних результатів подальших експериментів, наприклад: ферменти не можуть бути розрізані, ПЛР не може отримати потрібний фрагмент гена тощо.
Можливі причини:
1. Гетеропротеїнове забруднення, забруднення РНК.
Аналіз: колонку для очищення не промивали буфером PW;колонка для очищення промивного буфера PW не була промита за допомогою правильної відцентрової швидкості.
Рекомендація: перед додаванням етанолу переконайтеся, що в надосадовій рідині немає осаду;обов’язково промийте очисну колонку відповідно до інструкцій, і цей етап не можна пропускати.
2. Забруднення домішковими іонами.
Аналіз: Колонка для промивання буфера WB була пропущена або промита лише один раз, що призвело до залишкового іонного забруднення.
Рекомендація: обов’язково промийте Buffer WB 2 рази відповідно до вказівок, щоб якомога більше видалити залишкові іони.
3. Забруднення ферменту РНК.
Аналіз: Чужі РНКази були додані до буфера;Операція промивання буфера PW була неправильною, що призвело до появи залишків РНКази, що вплинуло на експериментальні операції РНК нижче за течією, такі як транскрипція in vitro.
Рекомендація: Набори для виділення нуклеїнової кислоти серії Foregene можуть видаляти РНК без додаткового додавання РНКази, тому в набір для виділення ДНК із буккального тампона/картки FTA не потрібно додавати РНКазу;обов’язково дотримуйтесь інструкцій для колонки для промивання буфера PW, і цей крок не можна пропускати.
4. Залишок етанолу.
Аналіз: Буфер WB не проводив центрифугування порожніх пробірок після промивання колонки для очищення.
Рекомендація: Виконайте правильну операцію центрифугування порожніх пробірок відповідно до інструкцій.
5. Інші забруднення домішками.
Аналіз: Збережені зразки або спеціальні зразки попередньо не обробляються.
Рекомендація: Ретельно попередньо обробіть зразок згідно з інструкцією.
