Lnc-RT Heroᵀᴹ I (з gDNase) (суперпремікс для синтезу кДНК першого ланцюга з lncRNA)
Технічні характеристики
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (з gDNase) — це система зворотної транскрипції, спеціально розроблена для lncRNA для швидкого видалення контамінації геномної ДНК.5×gDNase Mix може швидко видалити залишки генома в РНК при 42°C протягом 2 хвилин, ефективно уникаючи впливу геному на результати КПЦР.
5×L-RT HeroTM Mix містить спеціально розроблену компанією Foregene зворотну транскриптазу LncRNA Foregene, яка є новим типом зворотної транскриптази спеціально для lncRNA та інших шаблонів комплексу довгих РНК, з більшою спорідненістю до РНК і вищою ефективністю реверсивного запису.Оптимізована система підвищує швидкість зворотної транскрипції та може легко транскрибувати шаблони РНК із високим вмістом GC та складною вторинною структурою.Синтез першого ланцюга кДНК може бути завершений при 42°C за 15 хвилин.
Компоненти набору
| 5× gDNase Mix |
| 5× Суміш L-RT HeroTM |
| ddH2O без РНКази |
| Інструкції |
Особливості та переваги
■Ефективна здатність видаляти gDNA, яка може видалити gDNA в матриці протягом 2 хвилин.
■ Він може ефективно повернути назад транскрипцію lncRNA.Коли продукт зворотної транскрипції піддається КПЦР, значення Ct нижче, ніж у традиційній системі зворотної транскрипції.
■ Ефективна система зворотної транскрипції, для завершення синтезу першого ланцюга кДНК потрібно лише 15 хвилин.
■ Складні шаблони: шаблони з високим вмістом GC і складною вторинною структурою також можуть бути звернені з високою ефективністю.
■ Високочутлива система зворотної транскрипції, шаблони рівня pg також можуть отримати високоякісну кДНК.
■ Система зворотної транскрипції має високу термічну стабільність, оптимальна температура реакції 42℃, і він все ще має хорошу продуктивність зворотної транскрипції на 50℃.
Аплікація комплекту
Відносний кількісний аналіз lncRNA.
Абсолютний кількісний аналіз lncRNA.
Він може швидко й точно аналізувати сліди РНК, наприклад РНК вірусу.
Зворотна транскрипція РНК-матриць з високим вмістом GC або складною вторинною структурою.
Потік роботи
Зберігання та термін придатності
Зберігати комплект слід при -20°С. Зберігати продукт в холодильній камері постійної температури при -20°C відразу після отримання.Якщо умови зберігання відповідні, продукт не погіршить жодних характеристик протягом 1-річного періоду придатності.
Керівництво з аналізу проблем
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-специфічне посилення
1. Непродуманий дизайн грунтовки
Рекомендація: Створіть грунтовки відповідно до принципів дизайну грунтовок.
2. Залишки геному.
Пропозиція: Переконайтеся, що на першому етапі реакції видалення гДНК температура становить 42°C, а час реакції також можна подовжити до 5 хвилин.
Немає сигналу посилення за допомогою RT-qPCR
1. РНК деградує.
Рекомендація: матеріал для екстракції РНК має бути максимально свіжим, а РНК має бути високої якості та високої чистоти.
2. РНК містить інгібітори.
Рекомендація: інгібітори зворотної транскрипції зазвичай включають SDS, солі гуанідину, EDTA тощо. Рекомендується промити осад РНК 70% етанолом, щоб видалити інгібітори.
3. Питання дизайну грунтовки.
Рекомендація: відповідно до принципу конструкції праймерів переконструюйте праймери для перевірки.
Цільова смуга з’являється в пустому елементі керування
1. Забруднення операційних інструментів або реактивів.
Рекомендація: усі реагенти або обладнання для експерименту слід автоклавувати.Будьте обережні та ніжні під час поводження, щоб запобігти засмоктуванню зразків ДНК у піпетку або висипанню з центрифужної пробірки.
2. Зараження відбулося під час підготовки реакційної системи ПЛР.
Рекомендація: вживайте необхідних заходів обережності під час роботи, таких як: носіння латексних рукавичок, використання фільтруючих наконечників.Використовуйте ПЛР-суміш у реальному часі в системі, захищеній від забруднення.
3. Праймери деградували.
Пропозиція: використовуйте SDS-PAGE електрофорез, щоб виявити, чи праймери деградували, і замініть новими праймерами для експериментів з виявлення флуоресценції.
Посібник з експлуатації:
