фабричні торгові точки для високоефективної ПЛР у Китаї, ДНК-полімерази Taq Plus
Пам’ятаючи про цей девіз, ми перетворилися на одного з, мабуть, найбільш технологічно інноваційних, економічно ефективних і конкурентоспроможних виробників для заводських торгових точок для Китаю. Високоефективна ПЛР, ДНК-полімераза Taq Plus. У нашій фірмі, девізом якої є найвища якість, ми виробляємо продукти, які повністю виготовляються в Японії, від закупівлі матеріалів до обробки.Це дозволяє їм звикнути з впевненим спокоєм.
Пам’ятаючи про цей девіз, ми перетворилися на одного з, цілком можливо, найбільш технологічно інноваційних, економічно ефективних і конкурентоспроможних виробників дляКитайська ПЛР-ампліфікація, Qpcr, Професія, відданість завжди є фундаментальними для нашої місії.Ми завжди обслуговували клієнтів, створювали цілі управління цінністю та дотримувались щирості, відданості та наполегливої ідеї управління.
Технічні характеристики
50 × 20 мкл rxns, 200 × 20 мкл rxns, 1000 × 20 мкл rxns, 2000 × 20 мкл rxns
2X Real PCR EasyTM Mix-Taqman, що входить до комплекту Real Time PCR EasyTM-Taqman, є новою системою попереднього змішування, яка використовує спеціальні флуоресцентні зонди для реакцій ампліфікації ПЛР у реальному часі, що може значно покращити специфічність продукту та чутливість реакції.ROX надається як внутрішній контрольний барвник.
2X Real PCR EasyTM Mix-Taqman містить унікальну гарячу ДНК-полімеразу Taq від Foregene.Порівняно зі звичайними ферментами Taq він має такі переваги, як висока ефективність ампліфікації, сильна здатність до специфічної ампліфікації та низька швидкість невідповідності.Це може зменшити неспецифічну ампліфікацію та підвищити точність ПЛР.
Компоненти набору
2× Real PCR EasyTM Мікс-Такман |
20 × еталонний барвник ROX |
ddH без ДНКаз2O |
Інструкції |
Особливості та переваги
■ Простий — 2-кратна суміш для ПЛР для зменшення помилок експерименту та часу операції
■ Специфічний — оптимізований буфер і гарячий стартовий фермент Taq можуть запобігти неспецифічній ампліфікації та утворенню димеру праймера
■ Висока чутливість — може виявити низькі копії шаблону
■ Гарна універсальність — сумісний із більшістю інструментів для кількісної ПЛР у реальному часі
Аплікація комплекту
qPCR аналіз
Потік роботи
Графічний
Зберігання та термін придатності
Цей набір слід зберігати подалі від світла при -20 ℃.У разі частого використання його також можна зберігати при 4℃ протягом короткого періоду часу (10 днів). Пам’ятаючи про цей девіз, ми перетворилися на одного з, мабуть, найбільш технологічно інноваційних, економічно ефективних і конкурентоспроможних виробників заводських розеток для високоефективної ПЛР у Китаї, Taq Plus DNA Polymerase#P1032, 250u, у нашій фірмі з найвищою якістю для початку. як наш девіз, ми виробляємо продукцію, яка повністю виготовляється в Японії, від закупівлі матеріалів до обробки.Це дозволяє їм звикнути з впевненим спокоєм.
заводські розетки дляКитайська ПЛР-ампліфікація, Qpcr, Професія, відданість завжди є фундаментальними для нашої місії.Ми завжди обслуговували клієнтів, створювали цілі управління цінністю та дотримувались щирості, відданості та наполегливої ідеї управління.
Немає сигналів посилення
1. ДНК-полімераза Taq у наборі втрачає свою активність через неправильне зберігання або закінчення терміну придатності набору.
Рекомендація: Перевірте умови зберігання набору;повторно додайте відповідну кількість ДНК-полімерази Taq до системи ПЛР або придбайте новий набір для ПЛР у реальному часі для відповідних експериментів.
2. Є багато інгібіторів Taq ДНК-полімерази в матриці ДНК.
Пропозиція: повторно очистіть шаблон або зменшіть його кількість.
3. Концентрація Mg2+ не підходить.
Рекомендація: Концентрація Mg2+ у суміші 2× Real PCR Mix, яку ми надаємо, становить 3,5 мМ.Однак для деяких спеціальних праймерів і шаблонів концентрація Mg2+ може бути вищою.Таким чином, ви можете безпосередньо додати MgCl2 для оптимізації концентрації Mg2+.Для оптимізації рекомендується щоразу збільшувати Mg2+ на 0,5 мМ.
4. Умови ПЛР-ампліфікації невідповідні, а послідовність або концентрація праймера невідповідна.
Пропозиція: підтвердьте правильність послідовності праймерів і праймер не був деградований;якщо сигнал посилення поганий, спробуйте знизити температуру відпалу та відповідним чином відрегулювати концентрацію праймера.
5. Обсяг шаблону занадто малий або забагато.
Рекомендація: виконайте градієнтне розведення лінеаризації шаблону та виберіть концентрацію шаблону з найкращим ефектом ПЛР для експерименту ПЛР у реальному часі.
NTC має занадто високе значення флуоресценції
1. Забруднення реагентом під час роботи.
Рекомендація: замініть на нові реагенти для експериментів ПЛР у реальному часі.
2. Зараження відбулося під час підготовки реакційної системи ПЛР.
Рекомендація: вживайте необхідних заходів захисту під час роботи, таких як: носіння латексних рукавичок, використання наконечника піпетки з фільтром тощо.
3. Праймери руйнуються, і руйнування праймерів спричинить неспецифічну ампліфікацію.
Пропозиція: використовуйте електрофорез SDS-PAGE, щоб виявити, чи праймери деградували, і замініть їх новими праймерами для експериментів ПЛР у реальному часі.
Праймерний димер або неспецифічна ампліфікація
1. Концентрація Mg2+ не підходить.
Рекомендація: Концентрація Mg2+ у суміші 2× Real PCR EasyTM Mix, яку ми надаємо, становить 3,5 мМ.Однак для деяких спеціальних праймерів і шаблонів концентрація Mg2+ може бути вищою.Таким чином, ви можете безпосередньо додати MgCl2 для оптимізації концентрації Mg2+.Для оптимізації рекомендується щоразу збільшувати Mg2+ на 0,5 мМ.
2. Температура відпалу ПЛР занадто низька.
Пропозиція: щоразу підвищуйте температуру відпалу ПЛР на 1 ℃ або 2 ℃.
3. Продукт ПЛР занадто довгий.
Рекомендація: довжина продукту ПЛР у реальному часі має становити 100-150 bp, але не більше 500 bp.
4. Праймери деградують, і деградація праймерів призведе до появи специфічної ампліфікації.
Пропозиція: використовуйте електрофорез SDS-PAGE, щоб виявити, чи праймери деградували, і замініть їх новими праймерами для експериментів ПЛР у реальному часі.
5. Система ПЛР неналежна, або система замала.
Порада: занадто мала реакційна система ПЛР призведе до зниження точності визначення.Найкраще використовувати реакційну систему, рекомендовану приладом для кількісної ПЛР, для повторного проведення експерименту з ПЛР у реальному часі.
Погана повторюваність кількісних значень
1. Прилад несправний.
Пропозиція: між кожним ПЛР-отвором приладу можуть бути помилки, що призводить до поганої відтворюваності під час керування температурою або виявлення.Будь ласка, перевірте відповідно до інструкцій відповідного приладу.
2. Чистота зразка погана.
Рекомендація: нечисті зразки призведуть до поганої відтворюваності експерименту, що включає чистоту шаблону та праймерів.Найкраще повторно очистити шаблон, а праймери найкраще очищати SDS-PAGE.
3. Час підготовки та зберігання ПЛР-системи надто довгий.
Порада: використовуйте систему ПЛР у реальному часі для ПЛР-експерименту одразу після підготовки та не залишайте її надовго.
4. Умови ПЛР-ампліфікації невідповідні, а послідовність або концентрація праймера невідповідна.
Пропозиція: підтвердьте правильність послідовності праймерів і праймер не був деградований;якщо сигнал посилення поганий, спробуйте знизити температуру відпалу та відповідним чином відрегулювати концентрацію праймера.
5. Система ПЛР неналежна, або система замала.
Порада: занадто мала реакційна система ПЛР призведе до зниження точності визначення.Найкраще використовувати реакційну систему, рекомендовану приладом для кількісної ПЛР, для повторного проведення експерименту з ПЛР у реальному часі.