вступ:

Молекули РНК можуть інтенсивно взаємодіяти з іншими біологічними молекулами, такими як білок, ДНК і РНК, і таким чином існувати в клітинах і організмах у формі макромолекулярних комплексів.Серед них РНК-білкові комплекси існування та функціонування РНК Однією з важливих форм.Витягування РНК є класичним методом для скринінгу та ідентифікації молекул РНК, особливо взаємодіючих білків молекул lncRNA, і визнаний більшістю дослідників і міжнародних авторитетних академічних журналів.Сьогодні FORREGENE поділиться з вами експериментальним принципом і технічним процесом розтягування РНК, можливо, ви зможете цим скористатися

1. Експериментальний принцип технології розтягування РНК:

Транскрипція in vitro та синтез міченої біотином цільової lncRNA або фрагментів lncRNA (включаючи фрагменти РНК, що використовуються як позитивні та негативні контролі), та інкубація з клітинними екстрактами;використовуйте закріплені на авідині магнітні кульки для збору комплексів РНК-білок або РНК-РНК. Після ретельного промивання комплекс елююють.Якщо виявлено білкову молекулу-мішень, яка взаємодіє з lncRNA, виконайте електрофорез білка на продукті розтягування РНК, виявіть цільовий білок за допомогою фарбування сріблом і розріжте гель для мас-спектрометрії;також безпосередньо виконувати вестерн-блот перевірку продукту, що розкривається;якщо виявлено. Для цільових молекул РНК, які взаємодіють з lncRNA, продукти розтягування РНК піддаються екстракції РНК і виконується специфічне виявлення qRT-PCR.

2. Процес експерименту з технологією розтягування РНК:

3. Технічна служба для зняття РНК FOREGENE:

Культура клітин

Приготування клітинного загального/ядерного/плазмового білкового екстракту

Експеримент з розтягуванням РНК

Електрофорез SDS-PAGE, фарбування сріблом

Мас-спектрометрія та ВБ експерименти

Експериментальний звіт

4. Експериментальний випадок

На наступному малюнку показано результати виявлення РНК FJ Bio-Bio та електрофорезу SDS-PAGE, у якому червона стрілка позначає різницеву смугу:

Дослідницька група професора Сун Сю з Сичуаньського університету накопичила 15 років тривалого накопичення в галузі дослідження lncRNA.Foregene Bio та дослідницька група професора Сонг Сю співпрацювали, щоб запустити технологію розтягування РНК lncRNA, яка дасть вам задовільний результат у вашому експерименті.