Фермент Taq гарячого старту широко використовується.Порівняно зі звичайною ДНК-полімеразою, гарячий ензим Taq може ефективно уникнути неспецифічної ампліфікації та утворення димерів праймерів, а також може ефективно підвищити рівень успішності ампліфікації цільового гена.Особливо в галузі генетичного тестування, гарячий ензим Taq був визначений як обов’язковий стандарт у галузі, і звичайна ДНК-полімераза не повинна використовуватися.Як видно з вищесказаного, ферменти Taq з гарячим стартом широко використовуються.В даний час на внутрішньому ринку існує багато марок гарячих ферментів Taq, але не так багато гарячих ферментів Taq високої якості.Зіткнувшись із такою кількістю гарячих стартових ферментних продуктів Taq, як нам вибрати?

1. Виберіть гарячий ензим Taq з високою ефективністю ампліфікації

Ефективність ПЛР-ампліфікації тісно пов’язана з дією ферменту Taq.Після оптимізації хорошої системи ферментної реакції Taq ефективність ампліфікації перевищує 95%, а діапазон ампліфікації початкової кількості матриці є широким.Задовільну ампліфікацію можна отримати, коли вміст цільового гена низький, і отруїтися непросто, коли кількість матриці велика, а експоненціальний період ампліфікації тривалий.Для ферменту Taq із низькою продуктивністю, навіть якщо реакційна система була оптимізована багато разів, ефективність ампліфікації все одно становить менше 90%, форма «S» кривої ампліфікації неочевидна, нахил невеликий, а крива плоска.Коли кількість шаблону низька, його неможливо посилити, а коли кількість шаблону велика, ефект посилення не ідеальний.Тому вибір ДНК-полімераз з високою ефективністю ампліфікації є вирішальним для успіху ПЛР та кПЦР.

2. Виберіть гарячий ензим Taq із сильною дією ферменту

Ферментативна потужність ферменту Taq пов’язана з ефективністю ампліфікації.Як правило, чим сильніша ферментативна потужність гарячого стартового ферменту Taq, тим довший експоненціальний період росту ПЛР-ампліфікації, тим більш типова «S-подібна» крива, тим вище значення сигналу флуоресценції, і тим більше підходить для мультиплексного виявлення ПЛР.Фірмові ДНК-полімерази зі слабкою ферментативною потужністю зазвичай можуть підтримувати лише 2-плексні реакції.Під час проведення 3-плексних реакцій крива ампліфікації низька, значення сигналу флуоресценції низьке, і немає типової кривої ампліфікації, тому результати важко оцінити.

3. Виберіть гарячий ензим Taq з високою чутливістю

Взагалі кажучи, ДНК-полімераза має високу ефективність ампліфікації та високу чутливість, але є й невідповідності.Якщо кількість цільового гена у зразку, який потрібно ампліфікувати, низька, рекомендується перевірити чутливість ампліфікації ферменту Taq.Найпоширенішим методом виявлення є проведення 10- або 5-кратного градієнтного розведення фрагмента плазміди цільового гена, проведення ПЛР-детектування при нижчому розведенні та вибір ферменту Taq гарячого старту з вищою чутливістю виявлення.

Зі сказаного вище видно, що дослідники повинні обирати відповідно до власних експериментальних вимог та умов фінансування.Найкраще провести експеримент з градієнтним розведенням ампліфікації, щоб визначити ефективність ампліфікації та чутливість гарячого стартового ферменту Taq.

Приклад Foregene'ДНК-полімераза Taq:

ДНК-полімераза Foreasy HS Taq

опис

ДНК-полімераза Foreasy HS Taq — це ДНК-полімераза, що експресується в бактеріях Escherichia coli за допомогою технології рекомбінації генів.Фермент поєднується з унікальним реакційним буфером, який робить продукт високостійким і сумісним, і може безпосередньо використовувати лізат зразка (система Foregene Lysis) як шаблон для реакцій виявлення.

застосування

Якісна ПЛР та кількісна ПЛР детекція очищених і неочищених матриць.

Контроль якості

1. Активність екзогенної нуклеази не виявлена

2. Метод ПЛР для виявлення залишкової геномної ДНК без господаря

3. Він може ефективно ампліфікувати однокопійні гени в геномі людини

4. Зберігайте при кімнатній температурі протягом тижня, без явних змін активності

Детальна інформація про продукт: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/