Побудова SOP System

Встановіть SOP експерименту ПЛР, щоб стандартизувати поведінку персоналу експерименту.

Експериментатори суворо дотримуються робочих процедур і мінімізують забруднення ПЛР, яке може бути спричинене людським фактором, або запобігають виникненню забруднень під час операції.Крім того, експериментатор повинен володіти відповідними професійними знаннями та навичками, включаючи вміння працювати з відповідним обладнанням, прояснити весь робочий процес, оволодіти методами обробки забруднення та методами лабораторного контролю якості, а також бути здатним правильно інтерпретувати результати тесту.

Будівельний стандарт ПЛР лабораторії

Лабораторія ПЛР розділена на чотири зони, а саме зону підготовки реагентів, зону обробки зразків, зону ампліфікації та зону аналізу продуктів ампліфікації.Перші дві зони є зонами попереднього підсилення, а останні дві – зонами після підсилення.Зона преампліфікації та зона постампліфікації повинні бути строго розділені.Експериментальні матеріали, реагенти, папір для запису, ручки, чистячі матеріали тощо можуть надходити лише із зони попередньої ампліфікації в зону після ампліфікації, тобто із зони підготовки реагентів, зони обробки зразків, зони ампліфікації та зони аналізу продуктів ампліфікації, і не повинні текти у зворотному напрямку.Повітряний потік у лабораторії також має йти від зони попередньої ампліфікації до зони після ампліфікації, а не у зворотному напрямку.

Зменшіть експериментальні етапи

Якщо лабораторія виконує тільки ПЛР-детектування та ідентифікацію, рекомендується використовувати флуоресцентну кількісну ПЛР замість звичайної ПЛР.

Результати кількісного виявлення флуоресценції ПЛР можна збирати та аналізувати за допомогою флуоресцентних сигналів, тому немає необхідності відкривати кришку для електрофорезу після реакції, що дозволяє уникнути забруднення продуктів ПЛР, спричиненого витоком продуктів реакції з утворенням аерозолів.Якщо ви збільшите кількість отворів ковпачка під час етапу завантаження гель-електрофорезу, ймовірно, станеться аерозольне забруднення.Рекомендується популяризувати застосування кількісної ПЛР і поступово замінювати якісну ПЛР.

Прийняти систему боротьби з забрудненням UNG

Для ПЛР-реакції використовується система контамінації продукту UNG anti-PCR.

Система використовує dUTP замість dTTP.Після реакції ПЛР усі продукти ПЛР (фрагменти ДНК) об’єднуються з dUTP;у наступному раунді ПЛР-реакції фермент UNG, доданий до системи, інкубують при 37°C протягом 5 хвилин перед ПЛР, яка може бути специфічною. Деградують усі фрагменти ДНК, що містять dUTP, а потім проводять реакцію ПЛР.Це може повністю видалити аерозольне забруднення, спричинене продуктами ПЛР.Ефект показано на малюнку нижче:

Примітка. Для прямої серії ПЛР ви можете вибрати продукти серії системи захисту від забруднення продуктів ПЛР від FJ Biotech

Запропонуйте

Для лабораторій, які проводять широкомасштабне тестування генотипу, настійно рекомендується використовувати систему контамінації продуктів UNG проти ПЛР для тестування реагентів на додаток до будівництва відповідних лабораторій.

Нагадування: використання цієї системи не може видалити вже спричинене забруднення продукту ПЛР.Таким чином, систему UNG слід використовувати на початку відповідного тесту, а систему UNG слід завжди використовувати для ПЛР-ампліфікації, щоб запобігти контамінації продуктів ПЛР.Хибно позитивний.

Рекомендується використовувати систему Direct PCR-UNG компанії Forge Biotech при проведенні великомасштабного тестування, наприклад: Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG；

Plant Seed Direct PCR Kit-UNG；

Animal Tissue Direct PCR Kit-UNG；

Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG；

Набір Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.

Ця серія наборів від Foregene може не тільки виконувати ПЛР-детектування швидко та у великому масштабі, але також ефективно запобігати та контролювати забруднення продукту ПЛР.