1: Вчасно замініть експериментальні матеріали

Встановіть (NTC) негативний контроль і повторіть його багато разів.Якщо в лабораторії буде виявлено забруднення продукту ПЛР, вчасно замініть усі експериментальні матеріали.Такі як: повторно розбавити та підготувати праймери, повторно стерилізувати наконечник піпетки, пробірку EP, ddH2O тощо, замінити новою піпеткою та тимчасово позичити інші лабораторії для проведення ПЛР-експериментів.Заражену лабораторію необхідно провітрити та опромінити ультрафіолетовими променями, доки забруднення продукту ПЛР не буде усунено, перш ніж продовжити експеримент.

2: Збільште час впливу УФ-променів

Варто відзначити, що для видалення забруднення ДНК регулярне ультрафіолетове опромінення має бути продовжено на 2 години, ніж зазвичай.Незважаючи на це, ефект ультрафіолетового випромінювання на видалення невеликих фрагментів (нижче 200 bp) забруднення ДНК все ще поганий.

Довжина ультрафіолетової хвилі (нм) зазвичай становить 254/300 нм, і її достатньо для опромінення протягом 30 хвилин.Слід зазначити, що при виборі УФ для усунення контамінації залишкових продуктів ПЛР слід враховувати довжину продукту ПЛР і розподіл основ у послідовності продукту.УФ-опромінення ефективне лише для довгих фрагментів понад 500 bp і мало впливає на короткі фрагменти.

Під час УФ-опромінення піримідинові основи в продукті ПЛР утворюють димери.Ці димери можуть завершувати подовження, але не всі піримідини в ланцюзі ДНК можуть утворювати димери, і УФ-опромінення також може розірвати димери..Ступінь утворення димеру залежить від довжини УФ-хвилі, типу піримідинового димеру та послідовності нуклеотидів, прилеглих до ділянки димеру.Тому, якщо ПЛР-ампліфіковані фрагменти невеликі, рекомендується використовувати систему контамінації продукту UNG анти-ПЛР.

3：Поширені поглиначі забруднення ДНК

При додаванні піпеток легко утворюються аерозолі, чого важко уникнути, і вони швидко осідають.Тому, безсумнівно, хорошим вибором є часте використання спеціальних очисників забруднення ДНК, щоб запобігти поширенню забруднення ДНК.

4: Використовуйте систему захисту від забруднення UNG

Після видалення контамінації ПЛР-продукту випробувальна лабораторія може використовувати систему UNG для запобігання контамінації продукту ПЛР для запобігання контамінації продукту ПЛР.У загальних лабораторіях ви можете виконувати прості експериментальні розділи, суворо відокремлювати зону ПЛР-продукту від інших зон, встановлювати певні лабораторні правила та норми та проводити відповідне навчання для запобігання контамінації ПЛР-продукту.

Рекомендації: Створення належної лабораторії ПЛР, підтримка належного середовища ПЛР, формулювання стандартних робочих процедур ПЛР і культивування суворої обізнаності експериментаторів про роботу є ключем до запобігання або зменшення забруднення експериментів ПЛР.