Набір для виділення вірусної ДНК і РНК Набір для підготовки до очищення екстракції вірусної ДНК і РНК
Технічні характеристики
50 Preps, 200 Preps
Набір для виділення екстракції нуклеїнової кислоти вірусної РНК використовує спінову колонку та формулу, розроблену компанією Foregene, яка може ефективно витягувати високочисту та високоякісну вірусну РНК із таких зразків, як плазма, сироватка, безклітинна рідина організму та супернатант клітинної культури.Набір спеціально додає лінійний акриламід, який може легко захоплювати невеликі кількості РНК із зразків.RNA-Only Column може ефективно зв’язувати РНК.Набір може обробляти велику кількість зразків одночасно.
Весь набір не містить РНКази, тому очищена РНК не буде розкладатися.Буфер viRW1 і буфер viRW2 можуть гарантувати, що отримана вірусна нуклеїнова кислота не містить білка, нуклеази чи інших домішок, що може використовуватися безпосередньо для подальших експериментів з молекулярної біології.
Компоненти набору
| Лінійний акриламід |
| Буфер DRL |
| Буфер RW1, Буфер RW2 |
| ddH без РНКази2O |
| Колонка ДНК/РНК |
| Інструкції |
Особливості та переваги
■ Робота при кімнатній температурі (15-25 ℃) протягом усього процесу, без крижаної бані та низькотемпературного центрифугування.
■ Повний комплект Не містить РНКази, не потрібно турбуватися про деградацію РНК.
■ Високий вихід нуклеїнової кислоти: колонка лише для ДНК/РНК і унікальна формула можуть ефективно очищати ДНК і РНК.
■ Велика потужність обробки зразків: щоразу можна обробляти до 200 мкл зразків.
■ Швидка швидкість: проста в експлуатації та може бути виконана протягом 20 хвилин.
■ Безпека: органічні реагенти не потрібні.
■ Висока якість: очищені фрагменти РНК мають високу чистоту, не містять білків та інших домішок і можуть відповідати різноманітним експериментальним застосуванням.
Аплікація комплекту
Він підходить для екстракції та очищення вірусної нуклеїнової кислоти в таких зразках, як плазма, сироватка, безклітинна рідина організму та супернатант клітинної культури.
Потік роботи
Діаграма
Зберігання та термін придатності
■ Цей набір можна зберігати протягом 24 місяців у сухих умовах при кімнатній температурі (15-25 ℃);якщо його потрібно зберігати довше, його можна зберігати при 2–8 ℃.
■ Розчин лінійного акриламіду можна зберігати при кімнатній температурі протягом 7 днів;після отримання набору вийміть його та зберігайте при -20°C.
■ Після додавання лінійного акриламіду до буфера DRL його можна зберігати при 2-8°C протягом 48 годин.Будь ласка, використовуйте готове рішення.
Керівництво з аналізу проблем
Нижче наведено аналіз проблем, які можуть виникнути під час виділення вірусної ДНК/РНК, сподіваючись допомогти у ваших експериментах.Крім того, для інших експериментальних або технічних проблем, окрім інструкцій з експлуатації та аналізу проблем, ми надаємо спеціальну технічну підтримку, яка допоможе вам.Якщо у вас є якісь потреби, будь ласка, зв'яжіться з нами: 028-83360257 або електронною поштою:
Tech@foregene.com.
Відсутність екстракції нуклеїнової кислоти або низький вихід нуклеїнової кислоти
Зазвичай існує багато факторів, які впливають на ефективність відновлення, наприклад: вміст нуклеїнової кислоти в зразку, метод роботи, об’єм елюції тощо.
Аналіз поширених причин:
1. Під час процедури проводили льодову баню або низькотемпературне (4°C) центрифугування.
Рекомендація: Працюйте при кімнатній температурі (15-25°C) протягом усього процесу, не використовуйте баню з льодом і центрифугування при низькій температурі.
2. Зразок зберігався неналежним чином або зберігався занадто довго.
Рекомендація: Зберігайте зразки при -80°C і уникайте повторного заморожування та розморожування;намагайтеся використовувати свіжозібрані зразки для виділення нуклеїнових кислот.
3. Недостатній лізис зразка.
Рекомендація: Будь ласка, переконайтеся, що зразок і робочий розчин для лізису ретельно перемішані та інкубовані при кімнатній температурі (15-25°C) протягом 10 хвилин.
4. Неправильне додавання елюенту.
Порада: переконайтеся, що ddH2O, вільний від РНКази, доданий по краплях до середини мембрани очисної колонки, і не капайте його на кільце очисної колонки.
5. У буфер RW2 не було додано правильний об’єм абсолютного етанолу.
Пропозиція: дотримуйтесь інструкцій, додайте правильний об’єм абсолютного етанолу в буфер RW2 і добре перемішайте перед використанням набору.
6. Невідповідний обсяг проби.
Рекомендація: 200 мкл зразка обробляється на кожні 500 мкл буфера DRL.Надмірна обробка зразка призведе до зниження виходу екстракції нуклеїнової кислоти.
7. Невідповідний об’єм елюювання або неповне елюювання.
Рекомендація: об'єм елюенту очисної колонки становить 30-50 мкл;якщо ефект елюції незадовільний, рекомендується продовжити час при кімнатній температурі після додавання попередньо нагрітого ddH2O без РНКази, наприклад, 5-10 хв.
8. Етанол залишається на колонці після промивання буфером RW2.
Рекомендація: якщо етанол залишається після центрифугування з буфером RW2 протягом 2 хвилин, колонку можна помістити при кімнатній температурі на 5 хвилин після центрифугування, щоб повністю видалити залишки етанолу.
Очищена нуклеїнова кислота розкладається
Якість очищеної нуклеїнової кислоти залежить від збереження зразка, забруднення РНКазою, роботи та інших факторів.Аналіз поширених причин:
1. Зібрані зразки не зберігалися вчасно.
Порада: якщо зразок не використано вчасно після збору, негайно зберігайте його при -80°C при низькій температурі.Для виділення РНК спробуйте використовувати свіжозібрані зразки.
2. Зберіть зразки та кілька разів заморозьте та розморозьте.
Порада: уникайте заморожування та розморожування (не більше одного разу) під час збору та зберігання зразків, інакше вихід нуклеїнової кислоти буде зменшено.
3. РНКазу вводять в операційній або не надягають одноразові рукавички, маски тощо.
Рекомендація: Експерименти з екстракції РНК найкраще проводити в окремій операційній РНК, а лабораторний стіл перед експериментом слід прибрати.
Під час експерименту надягайте одноразові рукавички та маски, щоб найбільшою мірою уникнути деградації РНК, спричиненої введенням РНКази.
4. Реагент був забруднений РНКазою під час використання.
Рекомендація: замініть на новий набір для виділення вірусної ДНК/РНК для відповідних експериментів.
5. Центрифужні пробірки та наконечники піпеток, які використовуються для обробки РНК, забруднені РНКазою.
Пропозиція: переконайтеся, що центрифужні пробірки, наконечники піпеток, піпетки тощо, які використовуються для екстракції РНК, не містять РНКази.
Очищена нуклеїнова кислота впливає на подальші експерименти
ДНК і РНК, очищені колонкою для очищення, якщо вміст іонів солі та білка занадто високий, це вплине на подальші експерименти, такі як: ПЛР-ампліфікація, зворотна транскрипція тощо.
1. Елюйована ДНК і РНК мають залишкові іони солі.
Порада: переконайтеся, що правильний об’єм абсолютного етанолу додано до буфера RW2, і двічі промийте колонку для очищення зі швидкістю центрифугування, зазначеною в інструкції з експлуатації;Виконайте центрифугування, щоб мінімізувати забруднення іонами солі.
2. Елюйовані ДНК і РНК містять залишки етанолу.
Порада: після підтвердження промивання буфером RW2 виконайте центрифугування порожніх пробірок із швидкістю центрифугування, зазначеною в інструкції з експлуатації;якщо все ще є залишок етанолу, ви можете відцентрифугувати порожню пробірку, а потім помістити її при кімнатній температурі на 5 хвилин, щоб максимально видалити залишок етанолу.
Інструкції з експлуатації:
Інструкція з використання набору для виділення вірусної ДНК і РНК
